本发明公开了一种显微镜压片镜检自动对焦方法，首先将高清相机通过显微镜拍摄的每个湿片画面进行灰度处理，得到灰度图像；然后对灰度图像进行降噪（Blur）处理；将降噪处理后得到的图像切割为9个画面，分别对切割的每个画面进行边缘检测；当某一画面像素找到方差峰值时，则认为该画面已确定了焦面，记录该方差峰值和步进电机的脉冲值并保留；如果有超过10%的画面找到焦面，则认为正在接近焦点进入微调；当9个画面都定焦结束后，得到9个脉冲值数据和方差值，9个脉冲值数据按照得分权重计算期望值，将期望值记为该对焦过程的结果数据，即焦面位置，对焦完成。本发明采用多点对焦方法，解决了现有单个焦面处理时结果笼统焦面不准确的问题。