本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法。本发明利用固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法具体如下：首先制备重组枯草芽孢杆菌，构建L‑阿拉伯糖异构酶固定化酶催化剂；将重组枯草芽孢杆菌芽孢加入到D‑半乳糖反应液中，一定条件下振荡转化，得到D‑塔格糖。本发明构建一种新型的食品安全的固定化酶催化剂，并优化固定化酶合成D‑塔格糖的生物转化工艺，提高其转化率；其中，固定化酶催化剂的比活力高达2.10×10−9 U/芽孢，D‑塔格糖的转化率达95%。本发明开发了一套绿色、安全、高效、经济的D‑塔格糖的全新合成技术与方法，实现了食品级D‑塔格糖的高效生产，具有广阔的工业应用前景。