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专利名称一种猴子单倍体神经干细胞的获得方法
申请日2017-12-26
申请号/专利号CN201711435471.5
专利权人南开大学
申请人南开大学
发明人/设计人帅领;王海松;张文豪
公告日2018-05-18
公告号CN108048400A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明属于生物工程技术领域,公开了一种猴子单倍体神经干细胞的获得方法,在原有普通猴子干细胞培养基的基础上进行优化培养,用0.05%的胰蛋白酶/EDTA处理单倍体胚胎干细胞克隆,成为单细胞状态,用EB培养基进行悬浮培养,形成拟胚体球;从分化第一天开始,培养基中要加ROCK抑制剂Y‑27632来抑制细胞凋亡;在第五天EB培养基换为神经诱导培养基;将初步形成神经外胚层的EB球种在基底胶铺底的培养皿中,加入神经诱导培养基进行分化;挑取神经花环,种在30μg/ml多鸟氨酸和3μg/ml层粘连蛋白铺底的培养皿中;培养14天后,进行流式细胞术,分选单倍体细胞。本发明第一次实现了在体外获得猴子单倍体神经干细胞,并具有向神经下游方向分化的能力。
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