本发明属于药物分析领域，具体涉及一种NHS残留的检测方法，该方法采用液相色谱检测，所述液相色谱优选亲水性液相色谱(HILIC)。本发明通过添加剂及其浓度、流动相pH、溶剂、柱温、洗脱方式等多个条件的筛选与优化，最终得到了较好的分离效果。本发明的NHS液相检测方法，不同于一般的反相分离模式，样品无需进行柱前特殊处理，操作简单快捷，准确度高，灵敏度高，能够满足药物质量控制需求。