本发明涉及细胞培养领域，特别涉及一种生物工程培育眼全层角膜的方法，角膜各层分别培养，优点在于当病人不需要全角膜移植时，只需要培养患者需要的角膜层即可。本发明中提供的全角膜的制备方法，角膜表皮层和间质层的种子细胞是自体细胞，并且角膜内皮细胞来自捐赠者，可通过培养得到大量的内皮细胞，避免了捐赠者来源的有限性。本发明以胶原蛋白培养基作为表皮层和间质层的胶合介质，可以促进人生物工程角膜的神经内生长。本发明提供的全角膜或部分角膜，均具有良好的光学特性，手术后，患者全部恢复视力；并且角膜具有稳定的生化特性，无晚期角膜溶解，良好的生物相容性，无排斥反应。