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专利名称一种PBMC细胞的冻存方法及复苏方法
申请日2018-01-29
申请号/专利号CN201810082387.8
专利权人山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司
申请人山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司
发明人/设计人谭毅;张慧慧
公告日2018-06-01
公告号CN108094411A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明公开了一种PBMC细胞的冻存方法,包括:(1)PBMC细胞离心得到细胞沉淀,重悬,滴加2×冻存液,维持细胞悬液的密度为2×107/ml,分装到冻存管中;(2)放入程序降温仪,逐渐降温至‑90℃后转移至液氮中进行长期保存。本发明还公开了一种PBMC细胞的复苏方法,包括:(1)将保存有PBMC细胞的冻存管取出,迅速放入水浴中,反复震荡5~15次,震荡时间控制在3min以内;(2)细胞悬液用X‑VIVO无血清培养基洗涤,维持细胞密度在1~2×106/ml。本发明的冻存方法通过程序性降温仪精确控制降温速率,能有效避免冰晶的产生,降低细胞的损伤,显著提高PBMC细胞冻存复苏24h后的冻存复苏活率。
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