本发明公开了一种用于普鲁兰酶高效表达和高密度培养的枯草芽孢杆菌，属于生物工程技术领域。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑系统，依次敲除枯草芽孢杆菌WS5的nprB、bpr、mpr、vpr、epr和wprA这6个基因，分别得到WSH6、WSH7、WSH8、WSH9、WSH10和WSH11这6种枯草芽孢杆菌菌株。制备枯草芽孢杆菌WS5和上述六种菌感受态，转化普鲁兰酶表达质粒，得到七种普鲁兰酶重组菌，经过摇瓶筛选和3‑L罐上罐筛选。筛选得出宿主菌株为WSH9时产普鲁兰酶酶活最高，3‑L罐发酵78h，普鲁兰酶酶活可达2449.6U/mL，是目前报道的普鲁兰酶胞外最高水平。