本发明提供一种提高马尾松体胚诱导率的方法，包括外植体预处理、外植体消毒和体胚诱导工序，采集健康、无病虫害、合子胚处于裂生多胚期的马尾松优树未成熟球果作为外植体，对外植体进行预处理和消毒处理后，无菌剥取外植体球果中的雌配子体，将其平放于诱导培养基中并置于适宜的环境中培养，胚性愈伤诱导培养周期为：3‑4周，最后获得生长迅速、活力旺盛的马尾松胚性细胞系。本发明经过系列优化的外植体处理与消毒，再剥取球果中的雌配子体进行诱导，形成了大量活力旺盛的胚性细胞系，为进一步开展马尾松体胚育苗、种质创新与生物工程育种奠定了有力的物质资源与技术保障，具有较好经济效益、社会效益和生态效益。