本发明公开了一种用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，包括用于人巨细胞病毒DNA检测的特异性PCR引物和荧光探针、DNA内标检测的特异性引物和探针、PCR反应缓冲液、酶混合液、DNA内标、阴性质控品、强阳性质控品、弱阳性质控品和定量参考品A、B、C、D；其序列号见SEQIDNo.1~6。本发明的优点在于操作简单快捷，能在20min内完成人巨细胞病毒DNA的定量检测；灵敏度高，最低检出限为34.5IU/ml；特异性好，本发明根据内重复序列µl65设计1对引物，与其他病原体无交叉干扰，具有较高的特异性；本发明试剂盒可溯源至世界卫生组织（WHO）标准单位IU/mL，定量结果具有可追溯性，对于人巨细胞病毒核酸相关疾病的临床快速检测具有很高的参考价值，适于推广应用。