本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法，包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫，NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”，猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时，在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染，出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染；出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染；只显现一条红色条带“│”为阴性，两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强，敏感性高，反应谱广，可检测现有多数流行毒株，且操作简便、快速，可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测，易于在生产实践中推广应用。