本发明涉及一种d‑核糖发酵液中葡萄糖的检测方法，属于微生物发酵领域。采用高效液相色谱进行分析检测，将d‑核糖发酵液经预处理后按以下色谱条件进行检测：色谱柱：ShodexSUGARKS‑801或其他等效的色谱柱；流动相：水；流速：0.5ml/min‑1.2ml/min；检测器：示差检测器；色谱柱温度：70℃‑85℃；检测器温度：40℃；进样量：10μl。本发明快速、准确，为d‑核糖发酵液中葡萄糖的测定提供了一种可靠的分析方法。本发明操作简单、方便实用、安全环保、对发酵法生产d‑核糖具有现实的指导意义，本发明的检测方法精密度好、重复性高，能够快速、准确地测定d‑核糖发酵液中葡萄糖的含量，有助于提高食品添加剂d‑核糖的质量和安全可控性。