本发明公开了一种胰岛素定量检测试剂盒，包括胰岛素特异性抗体标记的磁微粒混悬液，胰岛素特异性抗体标记的辣根过氧化物酶，梯度浓度的标准品；所述胰岛素特异性抗体与磁性微粒以戊二醛两步交联法进行共价链接。本发明采用的化学发光免疫分析是将化学发光测定与免疫反应相结合的分析技术，制备的试剂盒具有灵敏度高、特异性强，线性范围宽，反应时间短，试剂稳定无毒害，重复性好，分析速度快，自动化检测等特点，相对免疫电泳法、免疫沉淀法等方法降低了对技术人员的要求，降低了不同技术人员、环境变化等对结果的影响，相对于放射免疫法降低了对环境的污染，具有很好的推广前景。