本发明提供S‑100β蛋白检测试剂盒，属于医学免疫学中荧光免疫层析技术领域，包括检测卡、IC卡和稀释液，检测卡包括吸附有稀土荧光微球标记的S‑100β单克隆抗体的结合垫；硝酸纤维素膜，其包被C反应S‑100β单克隆抗体的检测线和包被T反应羊抗鼠IgG抗体的质控线；样品垫；衬板和吸水纸。本发明试剂盒的测试样本为人的血清、血浆或全血样本，具备良好的检测特异性、较高的灵敏度、稳定性、操作的简便性，其用途为在体外定量检测人血清、血浆或全血样本中S‑100β蛋白的含量，用于临床上脑损伤的早期辅助诊断、评估脑损伤程度、指导治疗和判断预后。