本发明公开了一种酶标板单孔残液的体积测量方法，首先将酶按每孔a1ul、a2ul、a3ul、......anul分别加入空白酶标板的包被孔中,并加入等量的底物液和显色剂的混合物，然后加入终止液，用酶标仪测量每孔OD值后建立标准曲线；用酶代替洗板机洗液，对空白酶标板进行清洗；在酶标板包被孔中加入等量的底物液和显色剂的混合物，然后加入终止液，用酶标仪测量每孔的OD值；将每孔的OD值依次带入标准曲线，求得酶标板中各包被孔的残液体积。本发明的优点在于方法简单，能准确测量洗板机清洗后酶标板每一包被孔中的残液体积，必要时可测量到2ul以下极微量体积，保证了酶标板清洗数据精确可靠，同时为医学检验提供了可靠的数据。