一种采用非竞争性内标单点定量检测HCV的试剂，包括用于检测HCV靶标核酸的上游引物序列，如SEQIDNO.1所示；下游引物序列如SEQIDNO.2所示；用于检测HCV靶标核酸的探针序列，如SEQIDNO.3所示；内标的上游引物序列，如SEQIDNO.4所示；内标的下游引物序列，如SEQIDNO.5所示；内标的探针序列，如SEQIDNO.6所示；PCR反应液，内标参考品，其序列如SEQIDNO.7所示。本发明还提供了采用上述的试剂检测HCV浓度的方法。本发明可解决由于标本差异、不同管间扩增效率差异、以及对低浓度的定标的缺点，提高对HCV样本的定量准确性。