本发明公开了一种非洲猪瘟病毒快速检测卡及其应用，旨在解决非洲猪瘟病毒检测难的技术问题。该检测卡的金标垫上吸附有胶体金标记的抗非洲猪瘟病毒p30、p54和p72蛋白的多克隆抗体PoAbI；检测膜上设有羊抗或兔抗小鼠IgG抗体或金黄色葡萄球菌SPA印制的质控线C，还设有抗非洲猪瘟病毒p30、p54和p72蛋白的多克隆抗体PoAbII印制的检测线T。设计一种非洲猪瘟病毒快速检测卡的使用方法：采集待检样本加PBS或水混悬或研磨；滴入所述非洲猪瘟病毒快速检测卡的加样端；水平放置观察结果。本发明的非洲猪瘟病毒快速检测卡采用双抗体夹心法，特异性强、敏感性高，检测效率高，高效实用，具有重要的实际应用价值。