本发明提供了一种制备脂肪干细胞外泌体的方法、脂肪干细胞外泌体及其应用，属于生物工程技术领域，所述制备方法包括以下步骤：1)将脂肪干细胞与电转染工作液混合，得到混合液，将所述混合液与CTF1质粒混合，得到预转染物；2)将所述步骤1)得到的预转染物进行电击，得到转染CTF1基因的脂肪干细胞；3)将所述步骤2)得到的转染CTF1基因的脂肪干细胞进行常规培养后，收集脂肪干细胞外泌体。采用本发明提供的方法制备得到的脂肪干细胞外泌体可显著促进子宫内膜微血管内皮细胞增殖。