本发明提供了一种含有人SMIM25基因的重组质粒、基因工程菌、重组蛋白、多抗及制备方法和应用，涉及生物工程技术领域。本发明提供了一种重组质粒，该重组质粒含有人SMIM25基因片段。该质粒生产成本低，可以在大肠杆菌中经过诱导产生重组融合蛋白，以该蛋白作为抗原可制备SMIM25多抗，以快速、准确地检测SMIM25蛋白，从而对胃癌进行辅助诊断。本发明提供的SMIM25重组融合蛋白可以作为抗原进行相关免疫学实验。将该SMIM25重组融合蛋白作为免疫原与佐剂混合后注射家兔，经蛋白纯化后得到的多抗能够结合原核表达蛋白和人源细胞中的SMIM25蛋白，因此可以用于进一步研究SMIM25基因的具体功能。