本发明涉及食品检测技术领域，是一种鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR检测试剂盒，其特点是，它包含：动物组织线粒体DNA提取体系和三种多重PCR反应体系(阳性对照反应体系、阴性对照反应体系和鉴定反应体系)。PCR反应总体系为50μL，其中含有反应缓冲液5μL，dNTP2‑5μL，MgCl23μL，TaqDNA聚合酶1‑5μL，每种引物0.5‑2μL，待检样本DNA1‑3μL，余为双蒸馏水。鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤，能够同时区别鼠肉、山羊肉及绵羊肉的特异性；具有简便、快速、检测结果可靠等优点。