本实用新型提供了一种一次性标本收集盒，包括盒体和密封盖，所述密封盖密封地装配在盒体上端；其中，所述盒体的内部设有混匀腔、采集腔和储存腔，所述混匀腔与采集腔之间设有第一通道，所述采集腔和储存腔之间设有第二通道，所述第一通道和第二通道内分别设有粗过滤网和细过滤网；而且所述混匀腔的内部设有可驱动转动的搅拌器，所述储存腔内设有海绵。通过该标本收集盒即可在全封闭状态下进行自动加稀释液、自动混匀分离、自动采集，且密封性好，自动混匀分离准确性好，有很好的集卵效果，采集安全、可靠、卫生，无污染，工作效率高等诸多优点，完全解决了人工操作导致的效率慢、操作繁琐、空气污染等问题。