本发明提供了一种通过响应面法优化得到的富硒粗毛纤孔菌菌丝生长培养基，每1L培养基包括：麸皮50‑75g、葡萄糖30‑50g、亚硒酸钠42‑83mg、硫酸镁0.5‑1g、磷酸二氢钾0.8‑1.2g、维生素B10.8‑1.2mg、琼脂15‑20g，加水定容至1L。使用该培养基对粗毛纤孔菌菌丝进行培养，在相同培养条件下，与等量硒添加的对照培养基相比，菌丝生长速度提高了96.5%，且硒富集量达到31.584μg/g。该发明削弱了无机硒对粗毛纤孔菌菌丝生长的抑制作用，对富硒粗毛纤孔菌的进一步深入开发应用具有重要的作用。